Wysoka gęstość kości z powodu mutacji w białku związanym z receptorem LDL 5 ad

Wykonaliśmy analizy genetyczne i biochemiczne u krewnych z autosomalnym zespołem dominującym charakteryzującym się wysoką gęstością kości, szeroką i głęboką żuchwą oraz torusową palatyną. Metody
Przedmioty
W badaniu brało udział dwudziestu członków spokrewnionej z białymi przodkami z Connecticut. Protokół został zatwierdzony przez Komitet Śledczy ds. Ludzkich na Uniwersytecie Yale University School of Medicine. Wszyscy badani (lub ich opiekunowie, w przypadku nieletnich) wyrazili pisemną świadomą zgodę. Zgoda została również uzyskana od nieletnich. Badani dostarczyli historię medyczną i próbkę krwi do przygotowania DNA. Gęstość kości mierzono w 16 z 20 członków pokrewnych. Czterech członków, w których nie mierzono gęstości kości, obejmowało dwoje dzieci (w wieku 10 i 13 lat), jedną osobę, która zmarła przed badaniem oraz jedną osobę, która odmówiła udziału. Przeprowadziliśmy szczegółowe pomiary biochemiczne w surowicy i moczu u czterech członków pokrewnych o bardzo wysokiej gęstości kości; wartości te porównano z wartościami u dziewięciu zdrowych osób z grupy kontrolnej.
Pomiary gęstości kości
Mierzyliśmy gęstość mineralną kości w odcinku lędźwiowym, szyjce kości udowej i całym ciele, stosując absorpcjometrię rentgenowską podwójnej energii z densytometrem (QDR 4500W, Hologic lub DPXL, Lunar). Wyniki wyrażono jako wyniki z (liczba odchyleń standardowych od wartości średniej dla osób w ogólnej populacji dopasowanych do wieku, płci i rasy).
Ocena biochemiczna
Stężenie parathormonu i kwasoodpornej fosfatazy kwaśnej oraz poziomy metabolitów witaminy D w osoczu zostały zmierzone zgodnie z wcześniejszymi doniesieniami.22,23 Poziom wapnia w surowicy mierzono za pomocą absorpcjometrii atomowej. Stężenie kreatyniny i fosforanów w surowicy oraz poziomy izoformy kinazy kreatynowej mierzono za pomocą AutoAnalyzer (model 747-200, Hitachi) w kliniczno-chemicznym laboratorium szpitala Yale-New Haven w New Haven, Connecticut. Osteokalcyna w surowicy, specyficzna dla kości fosfataza alkaliczna, N-telopeptyd z kolagenu typu 1, receptor aktywujący jądrowy ligand czynnika .B, osteoprotegeryna, transformujący czynnik wzrostu .1 (TGF-.1) i fibronektyna zostały zmierzone przy użyciu zestawy. Średnie wartości (. SD) u osób dotkniętych chorobą i kontrolnych porównano z użyciem niesparowanych dwustronnych testów t.
Badania genetyczne
Polimorficzne markery na 11q genotypowano za pomocą testu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) i specyficznych starterów fluorescencyjnych i genomowego DNA od członków pokrewnych jako matrycy. Produkty frakcjonowano za pomocą elektroforezy w analizatorze DNA ABI 3700 (Applied Biosystems), a genotypy określono przy użyciu oprogramowania Genotyper. Przeanalizowaliśmy powiązanie za pomocą programu Linkage, określając wysoką gęstość kości jako autosomalną dominującą cechę z częstością alleli choroby 0,00001, całkowitą penetracją i częstością występowania fenokopii wynoszącą 0,00001. Nienaruszone obowiązkowe nośniki zostały sklasyfikowane jako nieznany fenotyp . Zmiana określonego modelu miała niewielki wpływ na wynik lod.
Mutacje LRP5 u członków pokrewnych poszukiwano przez amplifikację PCR krótkich segmentów obejmujących region kodujący i granice intron-egzon LRP5; produkty analizowano za pomocą elektroforezy w warunkach niedenaturowania
[podobne: gnozja, zespół psychoorganiczny objawy, potencjał oksydoredukcyjny ]
[podobne: przystosowanie roślin do życia w wodzie, epikotyl, budowa wewnętrzna łodygi ]